1 Уводзіны
Залішняя вага і атлусценне сталі глабальнымі праблемамі аховы здароўя і цесна звязаны з ішэмічнай хваробай сэрца, гіпертаніяй і парушэннямі абмену рэчываў. Існуючыя фармацэўтычныя гіпаліпідэмічныя і гіпаглікемічныя сродкі часта дэманструюць пабочныя эфекты, што выклікае цікавасць да бяспечных натуральных альтэрнатыў для рэгулявання ўзроўню глюкозы і ліпідаў у крыві.
Марскія водарасці, садавіна і гародніна багатыя актыўнымі злучэннямі з супрацьзапаленчымі, гиполипидемическими і гіпаглікемічных ўласцівасцямі.Саргассум верацёнападобнымпраяўляе антыаксідантную актыўнасць і-кіраванне вагой; куркумін можа мадуляваць ліпідны абмен; пуникалагин праяўляе супраць-запаленчае і-ліпідапаніжальнае дзеянне. Скрынінг -інгібітараў глюкозідазы і панкрэатычнай ліпазы сярод гэтых натуральных актыўных рэчываў забяспечвае аснову для распрацоўкі натуральных дапаможных гіпаглікемічных і гіпаліпідэмічных прэпаратаў.
2 Матэрыялы і метады
2.1 Матэрыялы і рэагенты
Саргассум верацёнападобным, куркумін, пунікалагін, -глюкозидаза, свіная панкрэатычная ліпаза, PNPG, 4-MUO і стандартныя інгібітары (акарбоза і орлістат) выкарыстоўваліся ў гэтым даследаванні.
2.2 Прыборы
Былі выкарыстаны сублімацыйная сушылка, ротарны выпарнік, астуджаная цэнтрыфуга, інкубатар-з пастаяннай тэмпературай, счытвальнік мікрапланшэтаў і сістэма звышчыстай вады.
2.3 Эксперыментальныя метады
2.3.1 Атрыманне воднага экстракта саргаса верацёнападобным
Гідратаваныя марскія водарасці экстрагавалі ў суадносінах цвёрдае рэчыва да вадкасці 1:50, награвалі пры 85 градусах на працягу 6 гадзін, цэнтрыфугавалі і-сушылі замаразкамі, каб атрымаць водны экстракт.
2.3.2 -Аналіз інгібіравання глюкозідазы
Для вызначэння інгібіруючай актыўнасці выкарыстоўваўся колориметрический метад ПНПГ.
2.3.3 Аналіз інгібіравання панкрэатычнай ліпазы
4-MUO служыў у якасці субстрата, і інтэнсіўнасць флуарэсцэнцыі вымяралася для разліку ўзроўню інгібіравання.
2.3.4 Эксперыменты з адным-фактарам
На аснове суадносін IC50 трох актыўных рэчываў (150:6:2) быў абраны дыяпазон масавых суадносін. Пры агульнай канцэнтрацыі 0,5 мг/мл стаўкі інгібіравання абодвух ферментаў былі вызначаны для кожнага суадносін.
2.3.5 Канструкцыя паверхні водгуку
Трох{0}}фактарная, трох-узроўневая канструкцыя RSM ацэньвала ўплыў суадносін трох інгрэдыентаў на інгібіраванне ферментаў, каб вызначыць аптымальную кампазітную формулу.
3 Вынікі і аналіз
3.1 Параўнанне значэнняў IC₅₀
Найбольш моцную інгібіруючую актыўнасць праявіў Пуникалагин:
-глюкозидаза:IC5₀=0.420 мг/мл
Панкрэатычны ліпаза:IC5₀=0.090 мг/мл
Куркумін праявіў ўмераную актыўнасць, тады якСаргассум верацёнападобнымэкстракт паказаў больш слабое інгібіраванне (IC5₀=38.22 мг/мл і 1,02 мг/мл).
Сярэдні каэфіцыент IC5₀ быў прыблізным150:6:2.
3.2 Эксперыменты з адным-фактарам
3.2.1 Суадносіны экстракта саргаса верацёнападобным
Інгібіраванне -глюказідазы зніжалася з больш высокімі прапорцыямі, у той час як інгібіраванне панкрэатычнай ліпазы дасягала піка ў каэфіцыенце 450. Выбраны аптымальны каэфіцыент450.
3.2.2 Суадносіны куркумін
Інгібіраванне -глюказідазы было самым высокім пры суадносінах 4, а інгібіраванне панкрэатычнай ліпазы дасягнула піка пры 6. Вызначанае аптымальнае суадносіны куркуміну4.
3.2.3 Суадносіны пунікалагіна
Пры фіксаваных умовах (450 Sargassum: 4 куркумін) паступовае павелічэнне пунікалагіна дазволіла вызначыць аптымальнае суадносіны вакол2, якія складаюць аснову для аналізу RSM.
3.3 Аналіз і аптымізацыя паверхні водгуку
RSM паказаў уплыў трох інгрэдыентаў на інгібіраванне ферментаў у наступным рэйтынгу:
Для -глюкозидазы:
куркумін > пуникалагин > экстракт саргассума
Для панкрэатычнай ліпазы:
куркумін> экстракт саргассума> пуникалагин
Аптымізацыя мадэлі дала ідэальнае суадносіны мас:
150:6:3 (экстракт саргаса: куркумін: пунікалагін)
Вымераныя вынікі інгібіравання:
-глюкозидаза:47.77%
Панкрэатычны ліпаза:74.18%
Значэнні дакладна адпавядаюць прагнозам мадэлі, пацвярджаючы надзейнасць мадэлі.
3.4. Інгібіраванне ферментаў аптымізаванай формулы
Аптымізаваная кампазітная формула дэманстравала значэнні IC5₀:
0,56 мг/млдля -глюкозидазы
0,210 мг/млдля панкрэатычнай ліпазы
Гэтыя былі значна мацней, чым уСаргассум верацёнападобныму адзіночку, што паказвае на сінэргічны ўзмацненне пасля спалучэння.
4 Абмеркаванне
Кожны з трох актыўных інгрэдыентаў валодае вядомым гіпаглікемічных і гиполипидемическим дзеяннем, а кампазітная формула дэманструе сінэргічны дзеянне. Аптымізаваны натуральны склад з'яўляецца бяспечным і паказвае моцны патэнцыял для перапрацоўкі ў функцыянальныя прадукты, накіраваныя на рэгуляцыю ўзроўню глюкозы ў крыві і ліпідаў. Аднак далейу натуральных умовахдаследаванні і захаванне нарматыўных патрабаванняў неабходныя для будучай распрацоўкі прадукту.
